厌氧培养箱的氧气置换是一个关键步骤，以确保培养箱内部形成无氧或低氧环境，从而满足厌氧微生物的生长需求。以下是一个详细的置换氧气步骤：
一、准备阶段
- 放置附件和器具：按使用要求放置好必要的附件和器具。
- 开启电源和照明：通电源开照明灯，开启温控仪，调节至所需温度。
- 放入干燥剂和指示纸：在操作室内放入干燥剂和美兰指示纸（封闭状态），用于检测氧气含量和湿度。
二、氮气置换阶段
- 密封手套：将乳胶手套套在观察板法兰圈上并扎紧，以防止气体泄漏。
- 氮气进气：接通氮气进气路，打开氮气控制阀，使手套鼓起，然后关闭阀门，并再次扎紧袋口。
- 重复置换：重复上述充氮过程，至少进行两次氮气置换。每次置换前，应确保取样室先抽真空，并用脚踏开关开闭排气。
三、混合气体置换阶段
- 调整混合气体：混合气体通常包含氮气（N2）、氢气（H2）和二氧化碳（CO2），按一定比例（如N2 85%、H2 10%、CO2 5%）混合。
- 混合气体进气：调换气路，打开混合气阀进气。充气时，取样室应先抽真空，并随时用脚踏开关开闭排气。
- 调整流量计：关掉混合气体阀后，打开另一阀门，使混合气体经过流量计。调整流量计，使流量控制在每分钟10ml左右。
- 重复置换：重复上述混合气体置换过程2~3次，以确保操作室内形成稳定的厌氧环境。
四、后续处理
- 催化除氧：打开操作室内的除氧催化器电源，进行催化除氧。一小时后，打开美兰指示纸观察其颜色变化，如不变色则表明操作室内已达到厌氧环境。
- 灭菌处理：开启紫外线灯，对操作室内进行灭菌处理。灭菌时间可根据具体实验要求自定。
五、注意事项
- 气体压力控制：在置换过程中，应严格控制气体的输入压力，以防爆管或损坏设备。
- 定期检查：连续使用厌氧培养箱时，应定期检查和补充除氧剂和干燥剂，确保室内厌氧条件的维持。
- 安全操作：在操作过程中，应严格遵守安全操作规程，防止气体泄漏或设备损坏。
通过以上步骤，可以有效地将厌氧培养箱内的氧气置换出去，为厌氧微生物的生长提供一个适宜的无氧或低氧环境。
